Чистые культуры микроорганизмов
Для культивирования микроорганизмов используется плотная питательная среда, чаще МПА. Ее предварительно расплавляют, остужают до 45— 50 °С и разливают в чашки Петри, в которые были высеяны последовательно убывающие количества исследуемого объекта (те или иные разведения) с находящимися в них микроорганизмами. Далее производится перемешивание жидкой питательной среды с внесенным в нее материалом. В результате при застудневании среды клетки фиксируются, прилипают каждая на определенном месте.
При последующем выращивании посевов в термостате в течение двух суток при 22 °С клетки размножаются, и на пластинках плотной среды в чашках Петри из каждой образуется масса клеток, называемая колонией. Они видны невооруженным глазом или при помощи лупы. Для анализа используют одну из чашек, на которой колонии достаточно крупные и расположены изолированно.
Каждая обособленная колония, представляя собой потомство одной клетки, будет чистой культурой того вида бактерий, к которому принадлежала исходная клетка.
Из колоний бактерии пересевают в пробирки с питательной средой, что и является завершающим этапом. выделения чистых культур. Так из множества различных бактерий, находящихся на том или ином объекте, удается изолировать отдельные виды.
При использовании описанного метода часть колоний развивается не на поверхности пластинки агара, а в его толще. Такие колонии имеют необычный вид — точечные, чечевичеобразные и другие, что представляет некоторые неудобства в дальнейшей исследовательской работе.
Этот метод введен в практику бактериологической работы Р. Кохом, поэтому и носит название метода пластинчатых культур Коха. Иначе его называют чашечным методом, или методом истощающего посева.
Завершается работа с чистыми культурами приготовлением и микроскопированием окрашенных препаратов бактерий из 1—2 колоний, предпочтительно из численно преобладающих типов. В препаратах устанавливаются форма клеток, наличие спор, семейства и род.
Pages: 1 2