Сульфитредуцирующие анаэробы
Из всех многочисленных патогенных и сапрофитных видов рода Clostridium семейства Bacillaceae наиболее частым и постоянным обитателем кишечника человека и животных является С1. perfrigens. В отличие от других анаэробов споровые анаэробы кишечного происхождения, в том числе и С1. perfringens, обладают редуцирующими свойствами при росте на железосульфитных средах, поэтому их называют сульфитредуцирующими анаэробами.
Микроорганизм вырабатывает шесть типов токсинов: А, В, С, D, Е, F.
Морфология. Cl. perfringens — грамположительная крупная (Q,8—1,5×4,0—8,0 мкм) неподвижная палочка, образует спору и капсулу. Спору образует на 5—7-е сутки и только на безуглеводистых, богатых белком щелочных средах; расположение спор центральное или субтерминальное. Микроб полиморфен (рис. 2).
Культуральные свойства. Cl. perfringens — факультативный анаэроб, легко культивируется, быстро растет (4—6. ч) на питательных средах, особенно с добавлением глюкозы. На кровяном сахарном агаре вырастают крупные округлые или продолговатые колонии серо-зеленого цвета, окруженные зоной гемолиза. При росте на среде Вильсона —Блёра с хлористым железом микроб восстанавливает сернистокислый- натрий в сульфат натрия. Сульфат натрия реагирует с хлористым железом, образует сернистое железо, которое имеет черный цвет. В месте образования колоний микроба четко видны черные точки и пятна. Рост на молоке Cl. perfringens сопровождается образованием ноздреватого губчатого сгустка казеина, который под действием газов высоко поднимается в пробирке.
Ферментативные свойства. Желатин разжижает медленно. Молоко свертывает быстро. Ферментирует глюкозу, лактозу, сахарозу, мальтозу, галактозу и другие сахара.
Устойчивость. Вегетативные формы погибают при 80°С через 30 мин; споры выдерживают кипячение 1— 2ч.
Cl. perfringens тип F отличается от других типов этого микроорганизма высокой устойчивостью спор, выдерживающих кипячение до 3—6 ч. При воздействии 3— 5% фенола вегетативные формы погибают через 15— 20 мин, споры — через 8—10ч.
Санитарно-показательное значение Cl. perfringens. Этот микроб постоянно обитает в кишечнике человека и животных. Поселяясь в кишечнике новорожденных в первые дни жизни, Cl. perfringens обнаруживается у взрослых людей в 72—98% случаев в титре до К)-3—10-1а. Следовательно, этот микроб можно рассматривать как показатель фекального загрязнения.
Из кишечника людей и животных Cl. perfringens выделяется преимущественно в виде вегетативных форм, а во внешней среде сохраняется в виде спор. По соотношению обнаруженных в исследуемом объекте вегетативных форм микроба и количества спор судят о давности фекального загрязнения.
Простота культивирования Cl. perfringens на питательных средах, характерный рост в молоке (образование ноздреватого губчатого сгустка казеина), редукция сульфита — все это помогает в идентификации его как санитарно-показательного микроорганизма.
В качестве санитарно-показательиого микроба С1. perfringens используют для контроля эффективности очистки сточных вод. Преимущество его перед кишечной палочкой состоит в том, что он не размножается в отстойниках. При комплексной санитарной оценке почвы, воды открытых водоемов наряду с Е. coli, энтерококком и бактериофагом учитывают Cl. perfringens, что позволяет определить давность фекального загрязнения исследуемых объектов.
Официально разработанных норм количественного учета Cl. perfringens в объектах внешней среды нет, но есть примерные показатели допустимого содержания этого микроба в почве (см. Микробиология почвы).