Работа № 6. Окрашивание микроорганизмов по граму
Для изучения морфологии микроорганизмов используют методы окраски анилиновыми красителями. Один из них — окраска по Граму — позволяет идентифицировать сходные по форме и размерам бактерии, относящиеся к разным видам и родам.
Приборы и посуда: предметные стекла, пипетки.
Материалы и реактивы: исследуемый материал, изотонический раствор хлорида натрия, бульон, кристаллический фиолетовый, раствор Люголя, 96 %-ный этиловый спирт, фуксин.
Порядок выполнения работы
1. Приготовление фиксированного мазка.
Исследуемый материал развести изотоническим раствором хлорида натрия или бульоном. Каплю размазать тонким слоем на предметном стекле на участке диаметром 1 см и высушить.
Мазок зафиксировать в пламени горелки.
2. Окраска микроорганизмов.
Мазок окрасить кристаллическим фиолетовым в течение 1—2 мин, а затем — раствором Люголя в течение 1—2 мин. Все микроорганизмы, находящиеся в мазке, приобретут темно-фиолетовый цвет.
Мазок обработать 96 %-ным этиловым спиртом в течение 0,5—1 мин. Остатки спирта смыть водой.
Под влиянием спирта одни бактерии обесцвечиваются, их называют грамотрицательные, другие сохраняют фиолетовую окраску — грамположительные. Грамотрицательные бактерии окрашиваются фуксином в красный цвет.
3. Написать отчет о проделанной работе.