Работа № 14. Санитарно-бактериологическое исследование молока и молочных продуктов
Приборы и посуда: термостат, стерильные колбы, чашки Петри, пипетки, пробирки, лупы с увеличением в 8—10 раз.
Материалы и реактивы: молоко и молочные продукты.
Порядок выполнения работы
1. Отбор пробы.
Молоко и молочные продукты из крупной тары отбирают в количестве не менее 0,25 л в стерильные колбы.
2. Определение общего количества бактерий в молоке.
Готовят специальные разведения для посевов следующим образом. Для получения разведения 1 : 10 отбирают стерильной пипеткой 1 мл молока или молочных продуктов и вносят их в 9 мл стерильного физиологического раствора. Из первого разведения 1 :10 аналогично готовят последующие— 1 : 100 и т. д. Для приготовления каждого разведения берут новую стерильную пипетку. При посеве на чашки Петри посевной материал вносят от большего разведения к меньшему.
От каждого разведения делают посев на 2—3 чашки Петри по 1 мл разведения. Затем в чашки Петри налить по 12—15 мл расплавленного и остуженного до 45 °С мясо-пептонного агара. При посеве и заливке агаром крышку чашки Петри быстро приподнимают и опускают, чтобы чашка не оказалась открытой.
После заливки агара содержимое чашки Петри тщательно перемешать, вращая и покачивая, чтобы равномерно распределить посевной материал. После застывания агара чашки Петри перевертывают крышками вниз и ставят в термостат, в котором установлена температура 37 °С, на 48 ч.
Подсчитать количество выросших колоний в каждой чашке, поместив ее вверх дном (без крышки) на темном фоне, пользуясь лупой. Для подсчета общего количества бактерий в 1 мл или 1 г образца число колоний, выросших на каждой чашке, умножить на соответствующее разведение. Полученные результаты по отдельным чашкам сложить, разделить на количество подсчитанных чашек и рассчитать среднее арифметическое.
3. Определение бактерий кишечной группы.
Степень обсеменения продуктов бактериями кишечной группы, или коли-титр, означает наименьшее количество продукта, выраженное в г или мл, в котором обнаружены бактерии группы кишечной палочки.
Подготовить разведения молока и молочных продуктов по методике, описанной выше. По 1 мл от каждого разведения засеять в пробирки со средой Кесслера и пробирки поместить в термостат при температуре 43 °С на 18—24 ч.
Пробирки с посевами просмотреть и установить коли-титр по описанной выше методике.
Продукт считается незагрязненным кишечной палочкой при отсутствии помутнения и образования газа в среде.
4. Написать отчет о проделанной работе.