Среды для обнаружения в объектах внешней среды бактерий группы кишечных палочек (часть 1)
Среда Эйкмана (глкжозопептонная среда). Для исследования используют нормальную и концентрированную среды. Состав нормальной среды следующий: пептон 10 г, хлористый натрий 5 г, глюкоза 5 г, вода водопроводная 1000 мл. В концентрированной среде состав всех ингредиентов, кроме дистиллированной воды, увеличен в 10 раз.
Пептон и хлористый натрий растворяют в воде при нагревании, доводят до кипения, фильтруют, добавляют глюкозу, устанавливают рН 7,4—7,6. Нормальную среду разливают в пробирки с бродильными трубочками по 10 мл, концентрированную — в пробирки по 1 мл и в колбы или флаконы с бродильными трубочками вместимостью 150— 200 мл по 10 мл. Стерилизуют текучим паром по 30 мин в течение 3 дней. При работе в экспедиционных условиях в состав среды вводят 0,5% агар-агара и разливают в пробирки без бродильных трубок.
Лактозопептонная вода. Состав среды: к пептонной воде (рН 6,8—7) добавляют индикатор Андреде или 0,001 %-ный раствор бромкрезола пурпурного. Стерилизуют при 120°С 20 мин. 10%-ный раствор лактозы в дистиллированной воде стерилизуют текучим паром 30 мин. Асептично вносят 5 мл раствора лактозы в 100 мл пептонной воды, разливают по 4 мл в стерильные пробирки с бродильными трубочками и кипятят в водяной бане 30 мин. Конечный рН 7,4—7,6. Контроль на стерильность осуществляют при 37°С в течение 24 ч.
Желточно-лактозный бульон с бриллиантовым зеленым. Состав среды: пептон 10 г, лактоза 10 г, свежая бычья желчь 200 мл, дистиллированная вода 500 мл. Компоненты растворяют рри нагревании, устанавливают рН 7,2—7,5, добавляют 13,3 мл 1%-ного водного раствора бриллиантового зеленого, объем доводят до 1000 мл дистиллированной водой, фильтруют через ватный фильтр, уточняют рН (7,4), разливают по 10 мл в пробирки с бродильными трубочками и стерилизуют при 120°С в течение 20 мин или текучим паром по 30 мин 3 дня.
Лактозный бульон с борной кислотой. Состав среды: протеозный пептон 10 г, лактоза 5 г; двухосновный фосфорнокислый калий (безводный1) 12,2 г, одноосновный фосфорнокислый калий (безводный) 4,1 г, борная кислота 3,5 г, дистиллированная вода 1000 мл.
Разливают по 7—10 мл в пробирки, стерилизуют при 121°С в течение 15 мин.
Среда Кесслер. Состав среды: пептон 10 г, бычья желчь (или желчь других сельскохозяйственных животных) 50 мл, водопроводная вода 1000 мл.
Кипятят- при помешивании 30 мин, фильтруют через вату, вносят 2,5 г глюкозы, устанавливают рН 7,4—7,6, добавляют 2 мл 1%-ного водного раствора генцианвиолета, разливают в пробирки с бродильными трубочками, стерилизуют при 112°С в течение 10 мин.
Среда Хейфеца. Состав среды: пептон 10 г, поваренная соль 5 г, маннит 5 г, вода дистиллированная 1000 мл.
Компоненты растворяют при нагревании, добавляют 10 мл 5%-ного спиртового раствора розоловой кислоты и 23 мл 0,1%-ного водного раствора метиленового синего, разливают в стерильные пробирки по 5 мл. Эту среду применяют для выявления кишечной, палочки в колбасных изделиях.
Среда ХБ (хинозол-бромкрезол пурпурная). Состав среды: 1 л дистиллированной воды, 10 г пептона, 5 г поваренной соли и 5 г маннита. Устанавливают рН 7,4—7,6, кипятят 15—20 мин, фильтруют, вновь кипятят 10 мин и охлаждают до 60°С. Затем стерильно добавляют 30 мл дрожжевого автолизата, 15 мл желчи (крупного рогатого скота), 10 мл хинозола (разведение 1 : 1000), 10 мл бромкрезола пурпурного (1,6%-ный спиртовой раствор). Среду разливают в стерильные пробирки по 6—7 мл. Цвет готовой среды фиолетово-пурпурный.
На правах рекламы: Чтобы жить, нужно питаться. Природа дала многое, овощи, фрукты, молоко, мясо. Но какой ребенок не отказывался от еды, и в какой семье не было разговора о выборе меню на вечер или на следующий день? В помощь хозяйке в таких случаях кулинарная книга. Разнообразные кулинарные рецепты, накопленные многими поколениями людей, собраны в одном источнике. В современных изданиях все рецепты сопровождаются красочными иллюстрациями, которые могут просто вдохновить на достижение новых вершин на кулинарном поприще.