Среды для обнаружения стрептококков и энтерококков
Среда Гарро. Ее используют для выделения стрептококков из материала, загрязненного споровыми грамположительными аэробами. К 100 мл расплавленного и охлажденного до 50—55°С питательного агара при рН 7,4 добавляют 3—5% дефибринированной кроличьей или бараньей крови и 0,2 мл 0,1%-ного водного раствора генциан-виолета. Все тщательно смешивают и разливают в чашки.
Теллуритлактозный бульон, или среда накопления Мак-Конки. Среда имеет следующий состав: пептон 0,5 г, лактоза 0,5 г, теллурит калия до получения конечной концентрации 1:15000, вода 100 мл.
Среду без теллурита калия стерилизуют при 112°С в течение 15 мин. Теллурит калия должен быть растворен в небольшом количестве воды при температуре ниже 40 С (так как он разлагается при нагревании) и добавлен к среде после стерилизации.
Среда Хайна и Перри. Ее используют в качестве среды для накопления энтерококков. Состав среды следующий: пептона 20 г, глюкозы 5 г, хлористого натрия 5 г, двухосновного фосфата калия 2,7 г, одноосновного фосфата калия 2;7 г, азида натрия 0,2 г, дистиллированной воды 1000 мл.
Компоненты растворяют при осторожном нагревании, разливают по 10 мл в широкие или обычные пробирки. Стерилизуют 20 мин при 120°С.
Щелочная полимиксиновая среда Калины. Среда состоит из 3 частей, приготавливаемых и стерилизуемых отдельно при 112°С в течение 12 мин:
А — дрожжевой автолизат 2 г, глюкоза 1 г, хлористый натрий 0,5 г, питательный бульон 23 мл;
Б — углекислая сода (Na2CO3) 0,53 г, вода дистиллированная 25 мл;
В — двухосновный фосфат калия 0,25 г, дистиллированная вода 25 мл.
После стерилизации смешивают, устанавливают рН 10—10,2 по фенолфталеину, добавляют дистиллированной воды до 100 мл. Затем добавляют 1,6%-ного спиртового раствора бромтимолового синего 0,2 мл; полимиксина М из расчета 200 ед. на 1 мл среды; стерильно разливают в пробирки по 5 мл или для больших объемов исследуемой жидкости по 50 мл.
Для достижения рН 10—10,2 готовят буферный раствор, состоящий из углекислой соды кристаллической (Na2CO3·10H2O)—0,72 г, двууглекислой соды (NаНСО3)—0,21 г, дистиллированной воды — 100 мл.
Индикатор — 0,1%-ный раствор фенолфталеина в 96°-ном спирте.
На 4—5 мл буферного раствора исследуемой среды добавляют по 3 капли раствора фенолфталеина. Сравнивают обе жидкости в компараторе.